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如何正確操作可見分光光度計?

發(fā)布日期:2025-12-17        訪問次數(shù):95

可見分光光度計作為一種基礎而重要的分析儀器,在石油化工、醫(yī)藥研發(fā)、環(huán)境監(jiān)測、材料科學及教育科研等多個領域發(fā)揮著關鍵作用。其原理是通過測量物質對可見光(通常波長范圍在360-1000 nm)的吸收特性,進行定性或定量分析。要獲得可靠、重復性好的測試數(shù)據(jù),規(guī)范、正確的操作流程至關重要。本文將系統(tǒng)介紹可見分光光度計的標準操作要點與注意事項。

一、 操作前的準備與校驗

儀器的穩(wěn)定狀態(tài)是數(shù)據(jù)準確的前提。開機前,需確保工作環(huán)境清潔、無強振動、避免強光直射,電源電壓符合儀器要求(通常為AC 100V-240V)。開機預熱是必要步驟,一般建議預熱15-30分鐘,使鎢鹵素燈光源及光學系統(tǒng)達到熱平衡,從而保證后續(xù)測量的穩(wěn)定性。預熱后,應進行基本的儀器性能核查,包括檢查透射比(%T)的零點(通常用遮光擋)和100%點(通常用空氣或參比溶液),確保儀器自檢功能正常。對于有波長精度要求的測試,需定期使用標準濾光片或溶液核查波長準確性,一般儀器的波長精度需在標稱范圍內(例如±3.0nm內)。

二、 波長的正確選擇與設置

波長選擇是測試的核心,直接關系到分析的靈敏度和準確性。應依據(jù)待測物質的標準吸收曲線或相關國家標準、行業(yè)方法中規(guī)定的特定波長進行設置。儀器波長范圍需覆蓋待測波長,例如常見指標如COD、氨氮、重金屬離子等均有其指定測試波長。轉動波長選擇旋鈕或通過數(shù)字設定時,應注意其最小格值(如2nm),并確保波長重復性(例如≤±1.5nm)滿足方法要求。

三、 比色皿的使用與參比設置

比色皿的清潔度與匹配性對結果影響顯著。必須使用干凈的比色皿,其透光面不可用手直接觸摸。對于精確定量分析,建議使用同一套匹配的比色皿。裝液時,液面高度適宜,外壁需擦凈,避免留下液滴或指紋。每次測量,均需正確設置參比溶液——通常為不含待測組分的溶劑或空白溶液。將參比池放入光路,進行100%T校準(即調滿度),以扣除溶劑、比色皿等因素的吸光度背景,這是獲得準確吸光度值(A值)的關鍵步驟。儀器的光度范圍通常覆蓋0-125%T,-0.097-1.999A,需確保樣品吸光度落在儀器的線性響應區(qū)間內。

四、 樣品的測量與數(shù)據(jù)處理

完成參比校準后,放入待測樣品池進行測量。讀取數(shù)據(jù)時,注意儀器顯示的是透射比(%T)還是吸光度(A),兩者可通過儀器功能切換。在定量分析中,多采用吸光度模式。為確保結果可靠性,同一溶液建議重復測量2-3次,觀察其透射比重復性(例如≤0.7%T),取平均值以減少隨機誤差。對于需要濃度直接讀數(shù)的應用,需先使用標準溶液建立校準曲線,并確認其線性關系良好,濃度計算范圍(如0-1999C)滿足測試需求。測量過程中,注意儀器穩(wěn)定性指標,如亮電流與暗電流短期波動應控制在一定范圍(如3分鐘內變化分別≤1%T和0.2%T)。

五、 日常維護與規(guī)范遵循

正確的維護能延長儀器壽命并保障性能。定期檢查光源(鎢鹵素燈)狀態(tài),及時更換老化燈泡。保持樣品室干燥清潔,防止溶液濺灑腐蝕光路。對于雜散光指標(例如在360nm、420nm處≤1%T),應通過定期校準和維護保持在較低水平。所有操作與校準記錄應妥善保存。在具體行業(yè)應用中,必須嚴格遵循相應的國家標準(GB)、行業(yè)標準或藥典等規(guī)定的測試方法,從樣品前處理到儀器參數(shù)設置、結果計算與報告,確保全過程規(guī)范統(tǒng)一。

綜上所述,正確操作可見分光光度計是一個系統(tǒng)性過程,涉及準備、校準、測量和維護多個環(huán)節(jié)。嚴謹遵循操作規(guī)程,關注儀器技術參數(shù)如波長精度、透射比準確度、穩(wěn)定性等與標準方法要求的契合度,是確保分析數(shù)據(jù)質量與精度的根本。

在眾多品牌與型號中,得利特的B1150可見分光光度計在相關技術規(guī)格與應用設計上,能夠滿足上述規(guī)范操作與行業(yè)測試的需求。該儀器采用單光束光路與衍射光柵光學系統(tǒng),波長范圍覆蓋360-1000nm,并具備LED數(shù)字顯示透射比、吸光度及濃度等功能,設計兼顧了操作的便捷性與測量的基礎穩(wěn)定性,適用于常規(guī)實驗室的日常分析工作。



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